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BIOREADER® 7000 -V
Für nicht-fluoro Anwendungen in 384-Well bis zu 6-Well Platten und Petrischalen.
MIt dem BIOREADER® 7000 -V lassen sich neben enzymatischen Elispot in 96 Well Platten auch andere Anwendungen wie Plaque/FOCI in verschiedenen Multiwell-Platten auswerten.
MIt den üblichen Festbrennweiten-Objektiven sind folgende Plattentypen im vollen Sichtfeld möglich: 6- bis 1536-Well-Platten, Terasaki-Platten, bis 100 mm Petrischalen und Zellkulturflaschen (z.B. T-Flask).
Und folgende Auflösungen sind möglich: 100 - 2000 µm für FOCI, 100 - 5000 µm für Plaques oder 50 - 2000 µm fürr Zellklone.
Objektivwechsler und Kamera-Fokussierung sind Programm-gesteuert und vollautomatisiert.
Dieser Bioreader® kann alle visuell sichtbaren Färbungen auswerten, zb. CV, DAB (3,3′-Diaminobenzidine), Substrates TMB,PCIP/NBT, AEC.
Modellvarianten:
Basic: 12 MPixel Kamera, 1 Festbrennweiten-Objektiv, z.B. für 96 Well Platten (mit hoher Auflösung) sowie 48 und 24 Well Platten (mit geringer Auflösung).
Alpha: 5 MPixel Kamera, 2-fach-Objektivwechsler, z.B. für 96 und 24 Well Platten (mit hoher Auflösung).
Beta: 5 MPixel Kamera, 3-fach-Objektivwechsler, z.B. für 96, 24 und 6 Well Platten (mit hoher Auflösung).
Gamma: 5 MPixel Kamera, 4-fach-Objektivwechsler, z.B. für 96, 24, 6 Well Platten und 50 mm Zellkulturflaschen (mit hoher Auflösung).
Testung antiviraler Substanzen
Dieser Bioreader® unterstützt die Testung und Entwicklung antiviraler Substanzen.
Beispiel#1: Die automatische Auswertung des Plaque-Reduktions Assay.
Bei diesem Assay werden unterschiedliche Konzentrationen eines möglichen antiviralen Stoffes in Multiwell-Platten appliziert und dessen Fähigkeit bestimmt die Ausbildung von Plaques (Quasi-Löscher im Zellrasen) zu unterdrücken.
Plaque-Reduktions-Neutralisation Test (PRNT) ist eine Variation dieses Testes. Hierbei wird versucht, den neutralisierenden Antikörper für einen bestimmten Virus zu finden. Diese Methode gilt als Goldstandard.
Beispiel#2: Die automatische Auswertung des 'Ausbeute Reduktion' Assays (Yield reduction assay)
In verschiedenen Arbeitsschritten werden Zellen in Gegenwart unterschiedlicher Konzentration der möglicherweise antiviralen Substanz infiziert.
Anschließend wir der Virus-Titer im Überstand mittels Plaque-Assay oder TCID50 mit dem Bioreader® bestimmt.
Der Titer ist der Quotient aus positiven Zellen/Gesamtzahl Zellen unter Berücksichtigung der Virus-Verdünnung und des Impfvolumens.
- Patentierte duale telezentrische Beleuchtung.
- Frontlader mit automatischer Tür.
- Objektivwechsler für hochauflösende Objektive mit Festbrennweite.
- Automatischer Fokus, Beleuchtung und Objektivwechsler sind Messprogramm--gesteuert (GxP-gesperrt).
- Hochauflösende Kamera mit 5 MPixel (bis zu 42 MPixel verfügbar).
- Exportfunktionen für Excel / Word / PowerPoint und LIMS.
- Interaktives inhaltsspezifisches Trainingsprogramme.
- Geeignet für Forschungszwecke.
- Zur "Phantomspot-Unterdrückung", besseren Spot-Trennung und Quantifizierung von Zytokinen.
- Optionale Vollautomatisierung mit 'Plattenfüllsystem'.
- DQ/IQ/OQ/PQ Dokumentation möglich.
- 12 Monate Garantie.
- EU-Konformitätserklärung und EMV-Zertifikat.
- Die innovative Bioreader® und EazyReader® Software kombiniert eine einfache Bedienung mit Vielseitigkeit und Flexibilität.
- Scan, Analyse und Überlagerung in Echtzeit.
- Erzeugung von bis zu 7 Bildern pro Scanvorgang.
- Mithilfe der 'Profiling' App können benutzerunabhängige Messprotokolle für Elispot-Anfänger und Referenzen für Experten erstellt werden.
- Verifiziert in kollaborativen Studien.
- Exportoptionen und Reports mit allen skalierbaren Bildern und Ergebnissen, auch in einer Datei.
- Kundenspezifische Export- und Reportvorlagen.
- Videoclips und inhaltsspezifische Hilfedateien.
- Qualifizierte Installation und begleitendes Training mit jedem Gerät.
- Vor-Ort- oder auch Internet-Services und -Support möglich.
- Klassifizierte Messprotokolle, Speicherung der Arbeitsverlaufes, Vergleichswerkzeuges.
- Benutzerspezifische Platten, Studien/Projekte, Platten-Layouts bzw. -Designs und Messprotokolle verhindern Verwechslungen.
- Genauere Zytokin-Quantifizierung basierend auf dem patentierten photometrischen dualen Beleuchtungssystem.
- Optionale Software Features:
- "Routine" Software-Paket: Optimierte Benutzeroberfläche für häufig verwendete Vorgänge und zeigt nur die Symbole an, welche Sie für entsprechende Tätigkeiten benötigen, schnelles Einlesen der Platten und schnelle Übersicht, Q.K. und Freigabe der Ergebnisse.
- 21 CFR part 11 basiertes Software-Modul.
Größe
Gewicht
Plaque-Assay: Sehr helle Plaques in 24 Well-Platte
Die Zellen wurden infiziert und mit einer Schicht bedeckt. Mit CV gefärbte Zellen überleben. Unbedeckte Zellen werden vom Virus abgetötet.
Foci Assay: Gesamtansicht der Well-Platte
"Der Focus-Forming-Assay (FFA) ist eine Variation des Plaque-Assays, jedoch mit Fokus auf der Verwendung von FFA Immunfärbungstechniken mit fluoreszenzmarkierten Antikörper, die für ein virales Antigen spezifisch sind, um infizierte Wirtszellen und infektiöse Viruspartikel zu erkennen, bevor ein tatsächlicher Plaque gebildet wird."
Elispot in 384-Well Mikrofilter-Platten
Kleineres Volume, dadurch ist ein höherer Durchsatz möglich.
Elispot - Zwei enzymatische Farben
blaue und rote Elispot Substrate (Mischfarbe violett)
Duale sezernierte Zytokine oder Antikörper
Elispot - Eine enzymatische Farbe
Blaues, rotes, grünes oder silbernes Elispot Substrat.
Nachweis von Antikörper. Das Substrat wirkt enzymkonjugierend und beschleunigend.
"Der Elispot Assay dient zum Nachweis sezernierter Zytokine oder Antikörper, die von einzelnen Immunzellen nach Stimulation mit Antigenen sezerniert und an einer Membran immobilisiert werden." [https://de.wikipedia.org/wiki/ELISpot]
Why Elispot?
The cytokine Elispot assay is designed to enumerate cytokine secreting cells in single cell suspensions of lymphoid tissue, CNS tissue, bone marrow or preparations of peripheral blood mononuclear cells (PBMC).
The assay has the advantage of detecting only activated/memory T cells and the cytokine release can be detected at the single cell level, allowing direct determination of T cell frequencies.
The ELISPOT assay is an effective tool to enumerate antigen-specific T cells in the circulation of immunized humans and animals at much lower frequencies than possible with other currently available methods.
The ELISPOT assay has proven to be a sensitive and unique system to follow disease progression in human individuals or animals. Several studies have indicated that alterations in the frequency of cytokine pc in different compartments of the body adequately reflect changes in immune function.
The ELISPOT assay may be used to determine effects of drugs, chemicals or other compounds on cytokine secretion in vitro, thereby providing data on their putative modulatory effects on immune function in vivo
The ELISPOT assay is currently being used increasingly for the quantitative assessment of peptide reactive T lymphocytes from PBMC in infectious disease (3, 9) or in the course of vaccination trials aimed at the induction of tumor-specific T cells in patients with cancer.
Elispot may be used for Diagnosis of genetic defects,Allergic diseases,Autoimmune diseases,Transplantation,Cancer research,Acute inflammation,Acute infectious diseases and septic shock.
Ungefärbte Zellen
AEZ Graustufen
"Typischerweise sind Typ 1 - Alveolarzellen - die Hauptgasaustauschfläche der Alveole und sind ein wesentlicher Bestandteil der Aufrechterhaltung der Permeabilitätssperrfunktion der Alveolarmembran. Typ 2 - Pneumozyten - sind die Vorläufer von Typ 1-Zellen und sind für die Tensidproduktion und die Homöostase verantwortlich."
[https://www.sciencedirect.com/topics/medicine-and-dentistry/alveolar-type-i-cells]
Das Alveolarepithel tritt bei toxischen Lungenexpositionen auf, da es dabei strukturell empfindlich ist und sich in der Nähe von inhalierten Giftstoffen befindet. Epithelzellen vom Typ 2 sind wichtig für die Aufrechterhaltung der Integrität des Alveolarepithels und der normalen Lungenfunktion.
MCMV (Maus Cytomegalovirus) ungefärbt
HCMV (Menschlicher Cytomegalovirus): ungefärbt
"Das Glykoprotein gO (UL74) des humanen Cytomegalovirus (HCMV) bildet einen Komplex mit gH / gL. Virusmutanten mit einer Löschung von gO zeigen einen Defekt in der sekundären Hülle mit der Folge, dass die Virusausbreitung auf einen zellassoziierten Weg beschränkt ist"
NK92 Zellen: natürliche Killerzellen (menschliche Zelllinie) gleiche Proben in Mikrowell-Platten
"NK-Zellen (natürliche Killerzellen) gehören zu den Lymphozyten (Untergruppe der weißen Blutzellen oder Leukozyten). Sie sind in der Lage, abnormale Zellen wie Tumorzellen und virusinfizierte Zellen zu erkennen und abzutöten. NK-Zellen besitzen keine Antigen-spezifischen Rezeptoren und gehören zum angeborenen Immunsystem. Gesunde Menschen haben einen Anteil von 5–15 % NK-Zellen an peripheren mononuklearen Blutzellen."
Foci Assay: Sehr hoher Schärfegrad
"Der Focus-Forming-Assay (FFA) ist eine Variation des Plaque-Assays, jedoch mit Fokus auf der Verwendung von FFA Immunfärbungstechniken mit fluoreszenzmarkierten Antikörper, die für ein virales Antigen spezifisch sind, um infizierte Wirtszellen und infektiöse Viruspartikel zu erkennen, bevor ein tatsächlicher Plaque gebildet wird."
Plaque-Assay: Extrem große Bereiche
"Die TCID50 (Median Tissue Culture Infectious Dose) ist eine Methode zur Überprüfung des Virustiters. TCID50 bezeichnet die Konzentration, bei der 50% der Zellen infiziert sind während ein Teströhrchen oder eine Vertiefungsplatte - auf der Zellen kultiviert wurden - mit einer verdünnten Lösung von Virusflüssigkeit hinzugegeben werden."
TCID50 Virus-Assay
Die Zellen wurden infiziert und mit einer Schicht bedeckt. Mit CV gefärbte Zellen überleben. Unbedeckte Zellen werden vom Virus abgetötet.
CV Plaque-Assay: Beispiel mit großen und unscharfen Plaques
Die Zellen wurden infiziert und mit einer Schicht bedeckt. Mit CV gefärbte Zellen überleben. Unbedeckte Zellen werden vom Virus abgetötet.
Verschiedene Medien- / Stammkombinationen auf Petrischalen
Verschiedene Kolonien auf 6-Mikrowell-Platten und 35 mm - 100 mm Petrischalen
Organoide
"Ein Organoid ist eine wenige Millimeter große, organähnliche Mikrostruktur, die mit Methoden der Zellkultur artifiziell erzeugt werden kann. Unter geeigneten Kulturbedingungen können Organoide aus einer oder wenigen Gewebezellen, embryonalen Stammzellen oder induzierten pluripotenten Stammzellen gezüchtet werden. Sofern keine mesenchymalen Stammzellen verwendet wurden, besitzen Organoide kein Stroma und keinerlei Gefäße. Sie zeigen dennoch physiologisch relevante, organähnliche Eigenschaften."
Neutralisationstest
"Der Neutralisationstest ist eine Variante des Plaque-Assays, mit dem neutralisierende Antikörper gegen bestimmte Viren im Serum eines Patienten oder eines Impflings nachgewiesen werden können. Durch die Bindung von Antikörper an die Oberfläche des Virus wird seine Aufnahme in die Zelle verhindert, sodass es zu keiner Vermehrung mehr kommen kann und die Anzahl an Plaques in einer Zellkultur reduziert wird. Daher bezeichnet man den Neutralisationstest auch als Plaque-Reduktions-Assay."
Antibiotika-Potenz USP / PhEur / DIN / BP-Petrischalen
Der Antibiotika-Wirksamkeitstest misst die Wirksamkeit eines Antibiotikums anhand des Ausmaßes der Wachstumshemmung bei empfindlichen Stämmen von Mikroorganismen in verschiedenen Konzentrationen.
AEZ Farbe
"Typischerweise sind Typ 1 -Alveolarzellen - die Hauptgasaustauschfläche der Alveole und sind ein wesentlicher Bestandteil der Aufrechterhaltung der Permeabilitätssperrfunktion der Alveolarmembran. Typ 2 - Pneumozyten - sind die Vorläufer von Typ 1-Zellen und sind für die Tensidproduktion und die Homöostase verantwortlich."
[https://www.sciencedirect.com/topics/medicine-and-dentistry/alveolar-type-i-cells]
Das Alveolarepithel tritt bei toxischen Lungenexpositionen auf, da es dabei strukturell empfindlich ist und sich in der Nähe von inhalierten Giftstoffen befindet. Epithelzellen vom Typ 2 sind wichtig für die Aufrechterhaltung der Integrität des Alveolarepithels und der normalen Lungenfunktion.
Alveoläre Epithelzellen (AEZ)
"Typischerweise sind Typ 1- Alveolarzellen - die Hauptgasaustauschfläche der Alveole und sind ein wesentlicher Bestandteil der Aufrechterhaltung der Permeabilitätssperrfunktion der Alveolarmembran. Typ 2 -Pneumozyten - sind die Vorläufer von Typ 1-Zellen und sind für die Tensidproduktion und die Homöostase verantwortlich."
[https://www.sciencedirect.com/topics/medicine-and-dentistry/alveolar-type-i-cells]
Das Alveolarepithel tritt bei toxischen Lungenexpositionen auf, da es dabei strukturell empfindlich ist und sich in der Nähe von inhalierten Giftstoffen befindet. Epithelzellen vom Typ 2 sind wichtig für die Aufrechterhaltung der Integrität des Alveolarepithels und der normalen Lungenfunktion.
