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BIOREADER® 7000 -F-z-i
Vielseitiger, invertierter hochauflösender Zoom
Fluoro / VIS Reader, Mikro + Makro Modus mit innovativer Power-LED-Fluoro-Anreg
Fluoro / VIS Reader, Mikro + Makro Modus mit innovativer Power-LED-Fluoro-Anreg
Der Bioreader® 7000 -F z i hat einen optischen Zoom-Bereich von 35 mm -100 mm Petrischalen bis zu 6 - 384 Well Platten.
Die optische Auflösung für gute Formerkennung liegt bei: 30 - 2000 µm für FOCI, 100 - 5000 µm für Plaques oder 50 - 2000 µm bei Zellklone.
Modellvarianten:
Fluoro Filtersätze installiert Max. VIS Lichtquellen
Alpha 1 3
Beta 2 3
Gamma 3 3
Delta 6 3
Alle Bioreader® 7000 -F-z-i Modellvarianten können auf bis zu 8 Fluoro Filtersätze aufgerüstet werden.
Unabängigkeit
Bioreader® und EazyReader® arbeiten mit allen gängigen Elispot-, Fluorospot-, Plaque-, Fluoro-Plaque- und CFU-Assays.
Sie können frei unter allen großen Assay-Herstellern wählen.
Testung antiviraler Substanzen
Dieser Bioreader® unterstützt die Testung und Entwicklung antiviraler Substanzen.
Beispiel#1: Die automatische Auswertung des Plaque-Reduktions Assay.
Bei diesem Assay werden unterschiedliche Konzentrationen eines möglichen antiviralen Stoffes in Multiwell-Platten appliziert und dessen Fähigkeit bestimmt die Ausbildung von Plaques (Quasi-Löscher im Zellrasen) zu unterdrücken.
Plaque-Reduktions-Neutralisation Test (PRNT) ist eine Variation dieses Testes. Hierbei wird versucht, den neutralisierenden Antikörper für einen bestimmten Virus zu finden. Diese Methode gilt als Goldstandard.
Beispiel#2: Die automatische Auswertung des 'Ausbeute Reduktion' Assays (Yield reduction assay)
In verschiedenen Arbeitsschritten werden Zellen in Gegenwart unterschiedlicher Konzentration der möglicherweise antiviralen Substanz infiziert.
Anschließend wir der Virus-Titer im Überstand mittels Plaque-Assay oder TCID50 mit dem Bioreader® bestimmt.
Der Titer ist der Quotient aus positiven Zellen/Gesamtzahl Zellen unter Berücksichtigung der Virus-Verdünnung und des Impfvolumens.
- Vollautomatisierung aller mechanischen Funktionen inkl. Fokus, Zoom und Blende.
- 8-fach Filterwechsler.
- Upgrade-Optionen von Modell Alpha auf Gamma und Delta.
- Duale telezentrische Beleuchtung zur besseren Quantifizierung von Zytokinen.
- Automatisches Zoomobjektiv für 6-48 Well-Platten und/oder Petrischalen.
- Festfokuslinse für 96-384 Well-Platten oder Petrischalen.
- Fluoro- / UV-LED-Anregung plus 3 Arten von Weißlicht-LED-Beleuchtungen.
- Messprogramm der Software steuert die Hardware automatisch (GxP-gesperrt).
- Keine Quecksilber- oder Deuteriumlampen erforderlich, daher 50 T Stundenlebensdauer.
- Verbesserte Unterdrückung der Autofluoreszenz, Cluster-Trennung, Well-Erkennung und der Quantifizierung des Cytokinvolumens.
- Mit der brandneuen Generation 7 wird die Positionierung deutlich schneller und präziser.
- Export mit einzigem Mausklick nach PDF, Microsoft Office®-Anwendungen.
- Frontlader, automatische Tür.
- Duale telezentrische Beleuchtung.
- Lautsprecher und interaktives Trainingsprogramm.
- Exportfunktionen für Excel / Word / Power Point und LIMS.
- Geeignet für Forschungszwecke.
- Kontrastreiche / rauscharme Kameras mit 5-41 MPixel erhältlich.
- Optionale Vollautomatisierung mit 'Plattenfüllsystem'.
- DQ/IQ/OQ/PQ Dokumentation möglich.
- 12 Monate Garantie.
- EU-Konformitätserklärung und EMV-Zertifikat.
- Die innovative Bioreader® und EazyReader® Software kombiniert eine einfache Bedienung mit Vielseitigkeit und Flexibilität.
- Scan, Analyse und Überlagerung in Echtzeit.
- Erzeugung von bis zu 7 Bildern pro Scanvorgang.
- Mithilfe der 'Profiling' App können benutzerunabhängige Messprotokolle für Elispot-Anfänger und Referenzen für Experten erstellt werden.
- Verifiziert in kollaborativen Studien.
- Exportoptionen und Reports mit allen skalierbaren Bildern und Ergebnissen, auch in einer Datei.
- Kundenspezifische Export- und Reportvorlagen.
- Videoclips und inhaltsspezifische Hilfedateien.
- Qualifizierte Installation und begleitendes Training mit jedem Gerät.
- Vor-Ort- oder auch Internet-Services und -Support möglich.
- Klassifizierte Messprotokolle, Speicherung der Arbeitsverlaufes, Vergleichswerkzeuges.
- Benutzerspezifische Platten, Studien/Projekte, Platten-Layouts bzw. -Designs und Messprotokolle verhindern Verwechslungen.
- Genauere Zytokin-Quantifizierung basierend auf dem patentierten photometrischen dualen Beleuchtungssystem.
- Optionale Software Features:
- 21 CFR part 11 basiertes Software-Modul
Gewicht
Größe
Plaque-Assay: Sehr helle Plaques in 24 Well-Platte
Die Zellen wurden infiziert und mit einer Schicht bedeckt. Mit CV gefärbte Zellen überleben. Unbedeckte Zellen werden vom Virus abgetötet.
Foci Assay: Gesamtansicht der Well-Platte
"Der Focus-Forming-Assay (FFA) ist eine Variation des Plaque-Assays, jedoch mit Fokus auf der Verwendung von FFA Immunfärbungstechniken mit fluoreszenzmarkierten Antikörper, die für ein virales Antigen spezifisch sind, um infizierte Wirtszellen und infektiöse Viruspartikel zu erkennen, bevor ein tatsächlicher Plaque gebildet wird."
Fluorospot 1-4 Farben
Multi-Farben/-Fluoreszenz Reader,
am besten geeignet für Elispot und FluoroSpot
Durch die Anwendung der 'local background compensation' gelingt es, die Zytokin Sekretion unabhängig vom lokalen Hintergrund zu quantifizieren.
Warum Fluorospot?
Enzymatische Elispot Färbung
• Erlaubt die Auswertung von 1-2 Zytokinen simultan.
• Falls Sie jedoch an doppel-sekretieren Zellen interessiert sind, so ist eine Interpretation sehr schwierig, da Zellen welche nahe beieinanderliegen überlappen könne und die Mischfarbe (Violett, Purple) nicht immer eindeutig auftritt.
Fluoro-Färbung
Erlaubt es -eine theoretische unbegrenzte Anzahl von- Zytokinen zu quantifizieren, da für jedes Zytokin ein eignes Bild pro Well zur Verfügung steht.. eines nach dem anderen...
Darum ist die Entscheidung ob es sich um eine doppelt sekretierende Zelle handelt einfach. Lokale Hintergrundkompensation und 'Offset Kompensation' sorgt für sichere Trennung von nahen beieinander liegenden Spots.
Darüber hinaus ist die Signal Intensität direkt proportional zu dem Analy /Zelle. Eine genauere Quantifizierung des sekretierten Zytokine -im Vergleich zu der enzymatischen Methode- ist damit möglich.
Elispot in 384-Well Mikrofilter-Platten
Kleineres Volume, dadurch ist ein höherer Durchsatz möglich.
Elispot - Eine enzymatische Farbe
Blaues, rotes, grünes oder silbernes Elispot Substrat.
Nachweis von Antikörper. Das Substrat wirkt enzymkonjugierend und beschleunigend.
"Der Elispot Assay dient zum Nachweis sezernierter Zytokine oder Antikörper, die von einzelnen Immunzellen nach Stimulation mit Antigenen sezerniert und an einer Membran immobilisiert werden." [https://de.wikipedia.org/wiki/ELISpot]
Why Elispot?
The cytokine Elispot assay is designed to enumerate cytokine secreting cells in single cell suspensions of lymphoid tissue, CNS tissue, bone marrow or preparations of peripheral blood mononuclear cells (PBMC).
The assay has the advantage of detecting only activated/memory T cells and the cytokine release can be detected at the single cell level, allowing direct determination of T cell frequencies.
The ELISPOT assay is an effective tool to enumerate antigen-specific T cells in the circulation of immunized humans and animals at much lower frequencies than possible with other currently available methods.
The ELISPOT assay has proven to be a sensitive and unique system to follow disease progression in human individuals or animals. Several studies have indicated that alterations in the frequency of cytokine pc in different compartments of the body adequately reflect changes in immune function.
The ELISPOT assay may be used to determine effects of drugs, chemicals or other compounds on cytokine secretion in vitro, thereby providing data on their putative modulatory effects on immune function in vivo
The ELISPOT assay is currently being used increasingly for the quantitative assessment of peptide reactive T lymphocytes from PBMC in infectious disease (3, 9) or in the course of vaccination trials aimed at the induction of tumor-specific T cells in patients with cancer.
Elispot may be used for Diagnosis of genetic defects,Allergic diseases,Autoimmune diseases,Transplantation,Cancer research,Acute inflammation,Acute infectious diseases and septic shock.
Elispot - Zwei enzymatische Farben
blaue und rote Elispot Substrate (Mischfarbe violett)
Duale sezernierte Zytokine oder Antikörper
Infektionsassay
Veränderbare mikroskopische Vergrößerung möglich.
Die Fluoreszenz ist grün.
Anhaftende Zellen (primär: humane Fibroblasten) befinden sich in 96-Well-Platten.
Fluorophore: DAPI und AlexaFluor488.
GFP/DAPI-exprmierte Virusinfektion
"Mithilfe der DNA-Rekombinationstechnologie wird ein RFP-Gen mit einem anderen Gen kombiniert, wodurch ein Protein gebildet wird. Dieser Komplex wird anschließend in einer Zelle eingefügt."
Siehe: [https://embryo.asu.edu/pages/green-fluorescent-protein]
RFP-exprimierte Virusinfektion
"Mithilfe der DNA-Rekombinationstechnologie wird ein RFP-Gen mit einem anderen Gen kombiniert, wodurch ein Protein gebildet wird. Dieser Komplex wird anschließend in einer Zelle eingefügt."
[https://embryo.asu.edu/pages/green-fluorescent-protein jedoch mit RFP anstelle von GFP]
Ungefärbte Zellen
Alveoläre Epithelzellen (AEZ)
"Typischerweise sind Typ 1- Alveolarzellen - die Hauptgasaustauschfläche der Alveole und sind ein wesentlicher Bestandteil der Aufrechterhaltung der Permeabilitätssperrfunktion der Alveolarmembran. Typ 2 -Pneumozyten - sind die Vorläufer von Typ 1-Zellen und sind für die Tensidproduktion und die Homöostase verantwortlich."
[https://www.sciencedirect.com/topics/medicine-and-dentistry/alveolar-type-i-cells]
Das Alveolarepithel tritt bei toxischen Lungenexpositionen auf, da es dabei strukturell empfindlich ist und sich in der Nähe von inhalierten Giftstoffen befindet. Epithelzellen vom Typ 2 sind wichtig für die Aufrechterhaltung der Integrität des Alveolarepithels und der normalen Lungenfunktion.
AEZ Graustufen
"Typischerweise sind Typ 1 - Alveolarzellen - die Hauptgasaustauschfläche der Alveole und sind ein wesentlicher Bestandteil der Aufrechterhaltung der Permeabilitätssperrfunktion der Alveolarmembran. Typ 2 - Pneumozyten - sind die Vorläufer von Typ 1-Zellen und sind für die Tensidproduktion und die Homöostase verantwortlich."
[https://www.sciencedirect.com/topics/medicine-and-dentistry/alveolar-type-i-cells]
Das Alveolarepithel tritt bei toxischen Lungenexpositionen auf, da es dabei strukturell empfindlich ist und sich in der Nähe von inhalierten Giftstoffen befindet. Epithelzellen vom Typ 2 sind wichtig für die Aufrechterhaltung der Integrität des Alveolarepithels und der normalen Lungenfunktion.
HCMV (Menschlicher Cytomegalovirus): ungefärbt
"Das Glykoprotein gO (UL74) des humanen Cytomegalovirus (HCMV) bildet einen Komplex mit gH / gL. Virusmutanten mit einer Löschung von gO zeigen einen Defekt in der sekundären Hülle mit der Folge, dass die Virusausbreitung auf einen zellassoziierten Weg beschränkt ist"
MCMV-Mutationen
Es wurden MCMV-Mutantionen erzeugt, welche mit tdTomato, eGFP oder mCherry exprimieren.
MCMV (Maus Cytomegalovirus) ungefärbt
MCMV (Maus Cytomegalovirus) rote Fluor-Remission
"Die Gattung Cytomegalovirus (auch Zytomegalievirus) umfasst derzeit sechs klassifizierte Virusspezies aus der Familie Herpesviridae." [https://de.wikipedia.org/wiki/Cytomegalovirus]
MCMV (Maus-Cytomegalovirus) grüne Fluor-Remission
"Die Gattung Cytomegalovirus (auch Zytomegalievirus) umfasst derzeit sechs klassifizierte Virusspezies aus der Familie Herpesviridae." [https://de.wikipedia.org/wiki/Cytomegalovirus]
Maus-Milzzellen, hauptsächlich Lymphozyten, die mit FITC-konjugierter Anti-Maus-CD45-Färbung angefärbt wurden
"Die Milz ist ein Organ, das in nahezu allen Wirbeltieren vorkommt. Ähnlich wie ein großer Lymphknoten wirkt er vor allem als Blutfilter. Eine 2009 veröffentlichte Studie an Mäusen ergab, dass das rote Fruchtfleisch der Milz ein Reservoir bildet, das mehr als die Hälfte der körpereigenen Monozyten enthält." [https://de.wikipedia.org/wiki/Milz]
Foci Assay: Sehr hoher Schärfegrad
"Der Focus-Forming-Assay (FFA) ist eine Variation des Plaque-Assays, jedoch mit Fokus auf der Verwendung von FFA Immunfärbungstechniken mit fluoreszenzmarkierten Antikörper, die für ein virales Antigen spezifisch sind, um infizierte Wirtszellen und infektiöse Viruspartikel zu erkennen, bevor ein tatsächlicher Plaque gebildet wird."
Plaque-Assay: Extrem große Bereiche
"Die TCID50 (Median Tissue Culture Infectious Dose) ist eine Methode zur Überprüfung des Virustiters. TCID50 bezeichnet die Konzentration, bei der 50% der Zellen infiziert sind während ein Teströhrchen oder eine Vertiefungsplatte - auf der Zellen kultiviert wurden - mit einer verdünnten Lösung von Virusflüssigkeit hinzugegeben werden."
TCID50 Virus-Assay
Die Zellen wurden infiziert und mit einer Schicht bedeckt. Mit CV gefärbte Zellen überleben. Unbedeckte Zellen werden vom Virus abgetötet.
CV Plaque-Assay: Beispiel mit großen und unscharfen Plaques
Die Zellen wurden infiziert und mit einer Schicht bedeckt. Mit CV gefärbte Zellen überleben. Unbedeckte Zellen werden vom Virus abgetötet.
Neutralisationstest
"Der Neutralisationstest ist eine Variante des Plaque-Assays, mit dem neutralisierende Antikörper gegen bestimmte Viren im Serum eines Patienten oder eines Impflings nachgewiesen werden können. Durch die Bindung von Antikörper an die Oberfläche des Virus wird seine Aufnahme in die Zelle verhindert, sodass es zu keiner Vermehrung mehr kommen kann und die Anzahl an Plaques in einer Zellkultur reduziert wird. Daher bezeichnet man den Neutralisationstest auch als Plaque-Reduktions-Assay."
Nachweis der Marek-Viruskrankheit nach Anfärbung mit spezifischen Anti-MDV-Antikörper und Alexa 568-markierten Sekundärantikörper
"Die Marek-Krankheit (auch Mareksche Krankheit) ist eine Viruserkrankung bei Hühnern, seltener anderer Hühnervögel. Sie geht mit einer Vermehrung der T-Lymphozyten (lymphoproliferativ) in Nerven, Eingeweiden, Keimdrüsen, Regenbogenhaut, Muskulatur und Haut einher. Mit MDV verwandte Viren scheinen gutartig zu sein und können als Impfstämme zur Vorbeugung der Marek-Krankheit eingesetzt werden."
Nachweis der Marek-Viruskrankheit nach Anfärbung mit spezifischen Anti-MDV-Antikörper und Alexa 488-markierten Sekundärantikörper
"Die Marek-Krankheit (auch Mareksche Krankheit) ist eine Viruserkrankung bei Hühnern, seltener anderer Hühnervögel. Sie geht mit einer Vermehrung der T-Lymphozyten (lymphoproliferativ) in Nerven, Eingeweiden, Keimdrüsen, Regenbogenhaut, Muskulatur und Haut einher. Mit MDV verwandte Viren scheinen gutartig zu sein und können als Impfstämme zur Vorbeugung der Marek-Krankheit eingesetzt werden."
Verschiedene Kolonien auf 6-Mikrowell-Platten und 35 mm - 100 mm Petrischalen
Verschiedene Medien- / Stammkombinationen auf Petrischalen
AEZ Farbe
"Typischerweise sind Typ 1 -Alveolarzellen - die Hauptgasaustauschfläche der Alveole und sind ein wesentlicher Bestandteil der Aufrechterhaltung der Permeabilitätssperrfunktion der Alveolarmembran. Typ 2 - Pneumozyten - sind die Vorläufer von Typ 1-Zellen und sind für die Tensidproduktion und die Homöostase verantwortlich."
[https://www.sciencedirect.com/topics/medicine-and-dentistry/alveolar-type-i-cells]
Das Alveolarepithel tritt bei toxischen Lungenexpositionen auf, da es dabei strukturell empfindlich ist und sich in der Nähe von inhalierten Giftstoffen befindet. Epithelzellen vom Typ 2 sind wichtig für die Aufrechterhaltung der Integrität des Alveolarepithels und der normalen Lungenfunktion.
Adenovirus
"Die Familie Adenoviridae oder Adenoviren umfasst unbehüllte Viren mit einer doppelsträngigen, linearen DNA als Genom. Ihr Kapsid hat eine ikosaedrische Symmetrie und besitzt einen besonderen, charakterisierenden Aufbau aus sogenannten Penton- und Hexon-Kapsomeren. An den Pentonen sind typische, antennenartige Fiberproteine verankert, die den Virionen der Familie ihr „satellitenartiges“ Erscheinungsbild geben.
Die Familie beinhaltet derzeit 47 human- und tierpathogene Virusspezies mit zahlreichen Subtypen bei Säugetieren, Vögeln, Reptilien und Fischen. Beim Menschen verursachen die humanen Adenoviren überwiegend Erkrankungen der Atemwege."
Antibiotika-Potenz USP / PhEur / DIN / BP-Petrischalen
Der Antibiotika-Wirksamkeitstest misst die Wirksamkeit eines Antibiotikums anhand des Ausmaßes der Wachstumshemmung bei empfindlichen Stämmen von Mikroorganismen in verschiedenen Konzentrationen.
GFP-Immunfluoreszenz auf HEK 293-Zellen
"HEK-Zellen ist die abgekürzte Bezeichnung für "Human Embryonic Kidney"-Zellen, (menschliche embryonale Nierenzellen). Diese Zelllinie wird auch als HEK-293 oder 293-Zellen bezeichnet. HEK-Zellen werden in der Zellbiologie seit vielen Jahren als vergleichsweise einfach zu handhabende Zelllinie eingesetzt."
Organoide
"Ein Organoid ist eine wenige Millimeter große, organähnliche Mikrostruktur, die mit Methoden der Zellkultur artifiziell erzeugt werden kann. Unter geeigneten Kulturbedingungen können Organoide aus einer oder wenigen Gewebezellen, embryonalen Stammzellen oder induzierten pluripotenten Stammzellen gezüchtet werden. Sofern keine mesenchymalen Stammzellen verwendet wurden, besitzen Organoide kein Stroma und keinerlei Gefäße. Sie zeigen dennoch physiologisch relevante, organähnliche Eigenschaften."
NK92 Zellen: natürliche Killerzellen (menschliche Zelllinie) exptimieren grün fluoreszierendes Protein (gfp)
"NK-Zellen (natürliche Killerzellen) gehören zu den Lymphozyten (Untergruppe der weißen Blutzellen oder Leukozyten). Sie sind in der Lage, abnormale Zellen wie Tumorzellen und virusinfizierte Zellen zu erkennen und abzutöten. NK-Zellen besitzen keine Antigen-spezifischen Rezeptoren und gehören zum angeborenen Immunsystem. Gesunde Menschen haben einen Anteil von 5–15 % NK-Zellen an peripheren mononuklearen Blutzellen."
NK92 Zellen: natürliche Killerzellen (menschliche Zelllinie) gleiche Proben in Mikrowell-Platten
"NK-Zellen (natürliche Killerzellen) gehören zu den Lymphozyten (Untergruppe der weißen Blutzellen oder Leukozyten). Sie sind in der Lage, abnormale Zellen wie Tumorzellen und virusinfizierte Zellen zu erkennen und abzutöten. NK-Zellen besitzen keine Antigen-spezifischen Rezeptoren und gehören zum angeborenen Immunsystem. Gesunde Menschen haben einen Anteil von 5–15 % NK-Zellen an peripheren mononuklearen Blutzellen."
